核酸在这几年似乎变成了热点词汇,随着疫情相关信息的传播,许多先前不为大众所知的诊断行业专业名词逐渐变得家喻户晓,如核酸检测、试剂盒、咽拭子、假阴性等等。但实际上,核酸并不是疫情下产生的新名词。
图1:大众认知的核酸检测
核酸提取通常是开启生物学研究的第一步,而且提取的核酸质量高低也是决定下游实验成败的关键因素之一。无论后续的检测、克隆、PCR、QPCR、建库测序等等都需要核酸才能顺利进行。今天我们就来简单了解核酸提取的基本原理和方法。
01 核酸提取法——种类有哪些?
现在常用的核酸提取法为离心柱纯法和磁珠法等,但离心柱纯化法效率低,步骤繁琐。而由于检测机构每天需要处理大量样本,大都是采用自动化核酸提取仪配套磁珠法核酸提取试剂盒的方式进行核酸提取步骤。
02 更效率的核酸检测法——磁珠法
磁珠法——通过裂解液裂解细胞组织样本,从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附携带核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内,通过反复快速搅拌、混匀液体,经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤,最终得到纯净的核酸。
图2:磁珠法步骤
核酸纯化的方法是影响所提取核酸质量的重要因素,只有高质量的核酸才能满足下游的各种应用。
03 磁珠法的有利工具——磁珠分离架
Bel-Art 磁珠分离架具备更优的质量
对于所有磁分离实验,强大的分离架可以固定磁珠,以便亲和配体(抗体,链霉亲和素或核酸偶联专用试剂)或在分析中添加或倾倒冲洗溶液。
图3:磁珠分离架
Bel-Art 磁珠分离架具备可拆卸套筒,可提高液体传输效率!与竞争品牌相比,它们提供了更加优越的质量和价值。
04 磁珠分离架——型号与特点
50ml和15/5ml型号的独立套筒使液体添加和移除更容易,液体意外损失更少;
强大的磁铁可快速固定磁珠;
50ml和15/5ml这两种型号的套筒上有弹簧柱塞允许磁珠在管壁的不同高度被收集;
只需转动管即可实现高效的珠粒混合;
96孔PCR板型号有24个磁铁,在管壁上吸住磁珠的同时紧紧地固定PCR板;
标准尺寸平板型号全部覆盖上了磁铁,以接受所有标准尺寸的微板,不管它有多少孔;比如6孔,12孔,24孔,48孔,96孔的平板等;
磁力架适合符合ANSI标准*的微孔板;
透明的亚克力材质便于观察试管的内容物。
*ANSI标准:ANSI SLAS 4-2004(R2012)
05 磁珠分离架——使用注意事项
该产品具有强大的磁性,使用时不要接近电子器材或者信用卡等磁记录物品;
清洁时避免使用酒精等溶剂,以防止亚克力塑料开裂。